玉米赤霉烯酮ELISA检测试剂盒

玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)ELISA检测试剂盒

产品名称： 玉米赤霉烯酮ELISA检测试剂盒

产品概述：玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又称F-2毒素，是玉米赤霉菌的代谢产物，具有雌激素样作用，具有较强的生殖毒性和致畸作用，可引起动物发生雌激素亢进症，导致动物不孕或流产，对家禽、猪、牛和羊的影响较大，给畜牧业带来很大的经济损失。

适用范围

玉米赤霉烯酮ELISA检测试剂盒可定性、定量检测玉米、大米、麦类、啤酒等样本中的玉米赤霉烯酮残留量。

检测限：0.2 ppb

试验原理

采用竞争ELISA，在微孔板上预包被玉米赤霉烯酮抗原，加入样本（或玉米赤霉烯酮标准品溶液）及辣根过氧化物酶标记的玉米赤霉烯酮抗体。样本或标准品溶液中的玉米赤霉烯酮与预包被在板孔上的玉米赤霉烯酮抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的玉米赤霉烯酮抗体。与样本或标准品溶液中的玉米赤霉烯酮结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物玉米赤霉烯酮抗原的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物玉米赤霉烯酮的含量。

试剂配制

1、样品稀释液：用去离子水将浓缩样品稀释液按1:9体积比进行稀释（1份浓缩样品稀释液+9份去离子水）。

2、洗涤工作液：用去离子水将浓缩洗涤液按1:9体积比进行稀释（1份浓缩洗涤液+9份去离子水）。

3、 50％甲醇水：取无水甲醇，用去离子水以1:1体积比例稀释（1份无水甲醇＋1份水）。

4、40％甲醇水：取无水甲醇，用去离子水以1:1体积比例稀释（4份无水甲醇＋6份水）

操作步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷冻。

3、洗涤工作液在使用前也需回温。

4、将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本50ml到对应的微孔中，加入酶标物50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应15min。

6、小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300ml/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。

7、加入显色液100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应15min。

8、加入终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处测定每孔OD值。

注意事项:

1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、每加一种试剂前需将其摇匀。

4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6、储存条件

  保存于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

7、试剂变质的迹象

发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。

8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为20～30min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到35min（或更长），但不得超过40min。反之，则减短反应时间。

9、*反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

试剂盒组成

1、96孔酶标板×1块

2、标准液×6瓶：（1ml/瓶）

0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb

3、酶标物 1瓶  …………………………………………… 6ml

4、显色液1瓶    ………………………………………  12ml

5、终止液      ………………………………………6ml

6、浓缩洗涤液 （10×） ………………………………… 40ml

7、浓缩样品稀释液（10×） ……………………………… 40ml

贮藏条件及保存期

  贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。

      保存期：有效期为12个月。

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