柱后衍生系统在河豚du素检测的新应用

柱后衍生系统在河豚du素检测的新应用

去年游族创始人遭人投毒致死，英年早逝令人惋惜。据某些报道称其中的毒之一就是河豚du素。像这样的河豚du素中毒事件在日常生活中也有发生。近日，广东省卫健委通报的广东三起较大级别的食物中毒事件中，其中两起为河豚du素中毒，且中毒两人均死亡。

什么是河豚du素呢

河豚du素（tetrodotoxin，TTX），分子式为C₁₁H₁₇O₈N₃，是鲀鱼类（俗称河豚鱼）及其它生物体内含有的一种生物碱。

河豚du素为氨基全氢喹唑啉型化合物，是自然界中所发现的毒性最大的神经毒素之一，曾一度被认为是自然界中毒性强的非蛋白类毒素。这种毒素主要作用于肠道，被肠道吸收后便会迅速作用于神经末梢和神经中枢，可高选择性和高亲和性地阻断神经兴奋膜上钠离子通道，阻碍神经传导，从而引起神经麻痹而致死亡。
 

据调查显示，河豚du素大部分存在于河豚当中，但是近几年在蟾蜍、蝾螈、蓝环章鱼中也检测到河豚du素的存在。越来越多的研究认为，河豚du素有可能是通过食物链传播到海洋生物体内的，并不只和河豚有关。

河豚体内的毒性在各个部位不同，甚者季节也会影响河豚体内的毒性。据研究显示，河豚在生殖季节毒性大，且雌性大于雄性，而在不同部位中，卵巢>脾脏>肝脏>血液>眼睛>鳃耙>皮肤>精巢。一般情况下，河豚的肌肉中是不含有毒素的，但河豚死后内脏中的毒素可少量地渗入肌肉中。
 

河豚du素化学性质和热性质均很稳定，一般家庭中的烹饪条件不能将其破坏，只有在高温加热30min以上或在碱性条件下才能被分解。而能将其破坏的条件要求较高，为220℃加热20-60min。这种的毒素的发病期很短，短至10-30min，长至3-6h发病，发病急，如果抢救不及时，中毒后最快的10min内死亡，最迟4-6h死亡。中毒后也缺乏有效的解救措施。所以，对于河豚du素的检测尤为重要。
 

方法介绍

目前食品中河豚du素的检测主要依据GB 5009.206-2016，包括小鼠生物法、液相色谱-串联质谱法、液相色谱-荧光检测法和酶联免疫吸附法。其中小鼠生物法虽为世界普遍的参考方法，但存在小鼠个体差别大导致结果异常的现象；液相色谱-串联质谱法仪器成本高，对操作人员水平要求严格；酶联免疫吸附法属于半定量方法且商品化试剂盒较少；故采用液相色谱-荧光检测法。

为保证检测结果更加精准可靠，普瑞邦特对该方法进行优化，采用诺尔液相搭配Pribolab^®MDS多功能光电衍生系统进行河豚du素的检测。经液相色谱分离后，河豚du素在Pribolab^®MDS多功能光电衍生系统内与高温的氢氧化钠溶液反应，生成具有强荧光效应的C₉碱，荧光检测定量限为300ppb，满足国标要求。

实验条件

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色谱柱: C ¹⁸ 柱,柱长 150mm ,内径 4. 6mm ,粒径 5 μ m ,或等效柱。

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流动相:乙腈 - 乙酸铵缓冲液( 5+95 ,体积比)。

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流速: 1. 0mL / min 。

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柱温: 30℃ 。

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检测波长:激发波长 385nm ,发射波长 505nm

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注：如需优化后的方法，请与我们联系

谱图

上图为1ppm河豚du素柱后衍生产物荧光谱图

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