免疫亲和柱基于抗原抗体反应，特异性抗体连接在柱体内，选择性吸附样品中的待检物，杂质不被吸附，流出柱外，柱上结合的目标物再被特定的洗脱液洗下来，可以用于液相色谱分析或者ELISA含量测定，是一种高效的前处理柱。可选择性吸附样品液中的毒素，从而对样品起到非常针对性的纯化作用，经过柱净化后的样品液可直接用于HPLC分析。它与HPLC配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，提高检测方法的准确度。
免疫亲和柱使用技巧：
1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高；
2、若样品为复杂样品，例如高蛋白、高油脂、酸性样品，可以将提取液分两次提取样品，可以提高提取效果；
3、样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀，约每秒1-2滴；
4、抗原抗体发生反应的最佳温度是在25℃左右，实验需要的环境温度最好是室温24℃-28℃，太高或太低的温度都会对回收率有一定的影响。在使用前需要恢复至室温再进行实验；
5、不要在无水状态下，琼脂容易干燥缩，影响质量；
6、储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温，因为缓冲液冻结，会严重影响亲和柱内的物理结构，对质量影响很大；
7、洗脱一般选择试剂甲醇，为增强洗脱效果可加大甲醇体积。
免疫亲和柱的选购要求：
柱容量抗体：抗体的性质决定了净化效果，抗体交叉反应多，净化的物质相对也多。厂家生产亲和柱会从成本角度考虑，那么就会出现不同的柱容量，亲和柱上连接的抗体越多，柱容量也相应增加，对客户来说高柱容量对于高污染样品减少了净化次数，降低了成本。
重要的指标：添加回收率是亲和柱的重要回收指标，再样品提取方法适当的条件下，添加回收是检测亲和柱性能的重要参考指标，请注意，空白样品的污染值应远远小于添加值，这样会减少误差。一般添加回收率应在80-110%之间为合格的亲和柱产品。
柱的吸附量：由于小分子在溶液中会吸附到凝胶上，在检查了添加回收率之后还应柱的吸附量，一般我们在洗脱步骤会给客户提供可靠的说明。
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